糖异生途径大部分反应是酵解途径的逆反应，由相同的酶催化。但是，在酵解途径中有3步反应是不可逆的，糖异生途径需采用不同的酶绕过酵解的3个不可逆反应。这些酶是：
1．丙酮酸羧化酶。
2．磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶。
3．果糖二磷酸酶。
4．葡萄糖-6-磷酸酶。
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