1.用途:最重要的AB0血型配合试验之一。必须在AB0血型相同,且交叉配血无凝集时才能输血。
2.目的:检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况。
3.原则:主侧加受血者血清与供血者红细胞;次侧加受血者红细胞与供血者血清,观察两者是否出现凝集。
4.方法(1)盐水配血法:简便快速。主要缺点是只能检出不相配合的完全抗体,而不能检出不完全抗体。
(2)抗球蛋白法配血法:又称Coombs试验。是最可靠的确定不完全抗体的方法,但操作繁琐。抗球蛋白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法。
直接抗球蛋白法可检查受检者红细胞是否已被不完全抗体致敏;间接抗球蛋白法可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。本法虽较灵敏,但也有一定限度,且操作复杂,不利于急诊检查和血库的大批量工作。
试剂:抗球蛋白试剂盒:包括抗广谱、抗C3、抗IgG等三种试剂。阳性对照:IgG型抗D致敏的5%RhD阳性红细胞生理盐水悬液。阴性对照:正常人5%O型红细胞生理盐水悬液。
注意事项:①标本采集后应立即进行试验,延迟试验或中途停止可使抗体从细胞上丢失。
②抗人球蛋白血清应按说明书最适稀释度使用,否则可产生前带或后带现象而误为阴性结果。
③阴性对照凝集:可能是抗人球蛋白血清处理不当,仍有残存的种属抗体,或被细菌污染,应更换血清重做试验。核实阴性结果方法:在该试管中加1滴IgG致敏红细胞,如结果为阳性,则表示试管内的抗球蛋白血清未被消耗,阴性结果可靠。④阳性对照不凝集:可能是抗人球蛋白血清或用于致敏红细胞的不完全抗D血清失效,或红细胞未洗净带入球蛋白所致,应更换血清或洗净红细胞后重做。如需了解体内致敏红细胞的免疫球蛋白的类型,则可分别以抗IgG、抗IgM或抗C3单价抗球蛋白血清进行试验。
(3)聚凝胺法配血法:可以检出IgM与IgG两种性质的抗体,能发现可引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体,故本法已逐渐推广使用。
配血原理:聚凝胶分子是带有高价阳离子多聚季铵盐,溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷,有利于红细胞凝集,低离子强度溶液也能减低红细胞的Zeta电位,可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时,与红细胞发生紧密结合,此时加入枸橼酸盐解聚液以消除聚凝胶的正电荷,使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生凝集不会散开。如血清中不存在IgM或IgG类血型抗体,加入解聚液可使非特异性凝集消失。
卡式配血/血型鉴定检测法已成为国际安全输血检查的推荐方法。
(4)凝胶配血法:又称微管(板)凝胶抗球蛋白试验,此法在凝胶中进行,保持了传统抗球蛋白试验的准确、简便、可靠的特点,全自动血型分析仪进行交叉配血,也是利用凝胶配血。
其他可检出不完全抗体的方法有蛋白酶法、胶体介质法等。
5.质量控制(1)血液标本:交叉配血的血液标本,受血者标本应为新鲜血,供血者标本应为血袋两端刚剪下小管中的血液。
(2)选用方法:用试管法做交叉配血。
(3)溶血现象:配血管出现溶血现象,为配血不合。