什么是碱性磷酸酶染色呢?快来跟着小编了解一下吧!
(1)原理(偶氮偶联法):血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.4~9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。
(2)结果判断:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀:
①(-)无灰褐色沉淀,为0分。
②(+)胞质出现灰褐色沉淀,为1分。
③(++)胞质深褐色沉淀,为2分。
④(+++)胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀,但密度较低,为3分。
⑤(++++)胞质全被深黑色团块沉淀所充满,密度高,甚至遮盖胞核,为4分。
该染色结果计算比较特殊,算积分值。
(3)正常血细胞的染色反应
1)碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞,除巨噬细胞可呈阳性反应外,其他血细胞均呈阴性反应。
2)成熟中性粒细胞碱性磷酸酶积分值的计算:在油镜下,计数100个成熟中性粒细胞(包括中性分叶核粒细胞和中性杆状核粒细胞)。分别记录其分级情况,全部阳性反应的细胞之和即为阳性率,将所有阳性反应细胞均以“+”级表示后,计算其总积分值。
例:某患者计数100个成熟中性粒细胞,其结果如下:
反应程度 | 细胞个数 | 积分值 |
- | 10 | 0 |
+ | 20 | 20 |
++ | 40 | 80 |
+++ | 20 | 60 |
++++ | 10 | 40 |
| 100(个) | 200(分) |
阳性率为90%,积分值为200 |
(4)参考值:成熟中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)的积分值为30~130。由于各实验室的实验条件不同,正常值也有差异,应建立本实验室的正常值。这里的正常值仅供参考。
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