双向扩散试验是什么呢?快来跟着小编了解一下吧!
让抗原和抗体在琼脂中各自向对方扩散,在比例恰当之处形成沉淀线,可对抗原或抗体进行定性分析。
双向扩散试验灵敏度低,出现结果慢,不能精确定量。根据试验形式可分为试管法和平板法两种。
(一)试管法 抗体——琼脂——抗原
(二)平板法 是鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一。
1.抗原或抗体的存在与否以及相对含量的估计
(1)沉淀线靠近抗原孔,则抗体含量较大;
(2)沉淀线靠近抗体孔,则抗原含量较大;
(3)不出现沉淀线则无对应的抗体(抗原)或者抗原过量。
2.抗原或抗体相对分子量的分析
(1)分子量小者扩散快,反之则较慢。
(2)由于慢者扩散圈小,局部浓度则较大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方;如果两者分子量大致相等,则形成直线。
3.抗原性质的分析
(1)两条沉淀线互相吻合相连,表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀,两个抗原相同;
(2)沉淀线呈部分相切,说明两个抗原之间有部分相同;
(3)两条沉淀线交叉而过,说明两个抗原完全不同。
4.抗体效价的滴定
固定抗原的浓度,稀释抗体;或者抗原和抗体双方皆作不同的稀释,经过自由扩散,形成沉淀线,以出现沉淀线最高的抗体稀释度为该抗体的效价。
5.抗原或抗体纯度鉴定 用混合抗原或抗体鉴定抗体或抗原,出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯,出现多条沉淀线说明不纯。
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