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动力学法测定酶的活性浓度

动力学法测定酶的活性浓度,为了帮助更多考生了解,医学教育网为大家搜集整理如下:

总单位时间内底物减少或产物增加的量。

在t2-t1时间内吸光度的变化与所测物质浓度成正比。

实际操作中,测定两个固定时间的吸光度差值,只要此期间待测物消耗<5%,就可以采用标准浓度对照法计算样本浓度,所以动力学法有时又称为固定时间法。

与终点法相比,动态法测定中待测物无须完全转化,故工具酶的用量较少,为了保证有足够的测定线性,所用酶的Km应足够大。如所用工具酶Km太小,可在反应体系中加入竞争性抑制剂,以加大Km。

动力学法对于测定仪器的要求更严格,动态法由于测定反应动态过程中的吸光度,检测的信号小,温度对测定的影响很大,这要求仪器的电噪声小,吸光度应读准到0.0001,温度变化<0.1%。

终点法可受到乳糜、黄疸和溶血的影响,测定时需设定样品空白。

以上是小编为大家精心整理的内容,希望对大家有所帮助,更多关于临床检验技士的资讯请继续关注医学教育网! 

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