琼脂扩散试验为可溶性抗原与相应抗体在含有电解质的半固体凝胶（琼脂或琼脂糖）中进行的一种沉淀试验。琼脂在实验中只起网架作用，含水量为99%，可溶性抗原与抗体在其间可以自由扩散，若抗原与抗体相对应，比例合适，在相遇处可形成白色沉淀线，是为阳性反应。沉淀线在凝胶中可长时间保持固定位置并可经染色后干燥保存医学教育|网搜集整理。沉淀线（带）对抗原与抗体具有特异的不可透性，而非特异者则否。所以一个沉淀线（带）即代表一种抗原与抗体的沉淀物，因而本试验可对溶液中不同抗原抗体系统进行分析研究。
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