方法名称: 黄藤-盐酸巴马丁的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定黄藤中盐酸巴马丁的含量。
本方法适用于防己科植物黄藤Fibraurea recisa Pierre.的干燥藤茎。
方法原理: 本品加1%盐酸甲醇溶液加热回流,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长345nm处检测盐酸巴马丁的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1. 1%盐酸甲醇溶液
2. 乙腈
3. 0.4%磷酸溶液
仪器设备: 1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按盐酸巴马丁峰计算应不低于5000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:乙腈 0.4%磷酸溶液=32 68
2.2检测波长:345nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1. 称取供试品
精密称定本品粉末(过三号筛)0.6g,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取盐酸巴马丁对照品适量,加1%盐酸甲醇溶液制成每1mL含30mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.6g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入1%盐酸甲醇溶液100mL,称定重量,放置过夜,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用1%盐酸甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2 mL,置10 mL量瓶中,用1%盐酸甲醇溶液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长345nm处测定盐酸巴马丁(C21H22NO4 · HCl)的峰面积,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p215。