方法名称：

氢化可的松乳膏—氢化可的松的测定—分光光度法

应用范围：

本方法采用分光光度法测定氢化可的松乳膏中氢化可的松的含量。

本方法适用于氢化可的松乳膏。

方法原理：

取本品适量，研细，加无水乙醇振摇1小时使氢化可的松溶解，并用无水乙醇定量稀释，摇匀，对照品同法配制，然后分别于供试品溶液和对照品溶液中加入氯化三苯四氮唑试液和氢氧化四甲基铵试液，并于25℃的暗处放置40-45分钟，然后照紫外-可见分光光度法，在485nm波长处，测定吸光度，计算，即得。

试剂：

1.无水乙醇

2. 氯化三苯四氮唑试液

3. 氢氧化四甲基铵试液

仪器设备：

可见分光光度计

试样制备：

1. 氯化三苯四氮唑试液

取氯化三苯四氮唑1g，加无水乙醇使溶解成200mL，即得。

2. 氢氧化四甲基铵试液

取10%氢氧化四甲基铵溶液1mL，加无水乙醇使成10mL，即得

3. 供试品溶液的制备

取本品适量（约相当于氢化可的松20mg），精密称定，置烧杯中，加无水乙醇约30mL，在水浴上加热使溶解，再置冰水中冷却，滤过，滤液置100mL量瓶中，如此提取3次，滤液并入量瓶中，放至室温用污水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

4. 对照品溶液的配制

取氢化可的松对照品约20mg，精密称定，置100mL量瓶中，加无水乙醇适量使溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤：

精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各1mL，各精密加入无水乙醇9mL，与氯化三苯四氮唑试液1mL，摇匀，各精密加入氢氧化四甲基铵试液1mL，摇匀，在25℃的暗处放置40-45分钟，照紫外-可见分光光度法，在485nm波长处，依法测定吸光度，计算，即得。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.403。