方法名称：

牛黄消炎片－华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的测定－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定牛黄消炎片中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的含量。

本方法适用于中成药牛黄消炎片。

方法原理：

本品加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长296nm处检测华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1. 甲醇

2. 乙腈

3. 0.5%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2）

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按华蟾酥毒基峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 0.5%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.2）=50 50

2.2检测波长：296nm

2.3柱温：40℃

试样制备：

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取10片量，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取华蟾酥毒基对照品、脂蟾毒配基对照品适量，加甲醇制成每1mL各含50mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取10片量，精密称定，摇匀，放置过夜，超声处理（功率250W，频率50kHz）20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长296nm处测定华蟾酥毒基（C26H34O6）、脂蟾毒配基（C24H32O4）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p384。