目的
探讨孕三烯酮对子宫内膜异位症细胞中PTEN基因表达的影响及对细胞凋亡的诱导作用。
方法
体外原代培养人子宫内膜异位症细胞,经不同浓度孕三烯酮作用后,采用四甲基偶氮唑兰(MTT)比色法、透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况,应用Western免疫印记法,观察药物作用前后PTEN基因的表达变化。
结果
原代培养的子宫内膜异位症细胞经孕三烯酮处理后,细胞生长被明显抑制,并呈剂量-时间依赖性;透射电镜下可见细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等凋亡的典型形态学变化;流式细胞仪检测提示,细胞周期从G1期到S期发生抑制,并在G1峰前出现明显的凋亡峰(15.0%);细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带;PTEN基因的表达显著上调(P<0.05)。未经孕三烯酮作用的子宫内膜异位症细胞无明显凋亡表现,PTEN基因呈低水平表达。
结论
孕三烯酮能够诱导子宫内膜异位症细胞的凋亡并上调PTEN基因的表达,这可能是孕三烯酮治疗子宫内膜异位症的分子机制之一。
19世纪80年代后,孕三烯酮已被广泛应用于子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)的治疗,但迄今为止,有关其确切作用机制的研究报道较少。新近发现的第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphataseandtenˉsionhomologuedeletedonchromosome10,PTEN)能对细胞生长、凋亡、增殖及粘附等多个方面产生影响,并已被认为是子宫内膜的看家基因,在多种子宫内膜病变的发生发展中发挥着重要作用。