方法名称:
明目地黄丸-丹皮酚的测定-高效液相色谱法
应用范围:
本方法采用高效液相色谱法测定明目地黄丸中丹皮酚的含量。
本方法适用于中成药明目地黄丸。
方法原理:
本品加甲醇超声处理,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值,计算出其含量。
试剂:
甲醇
仪器设备:
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按丹皮酚峰计算应不低于3500。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇 水=70 30
2.2检测波长:274nm
2.3柱温:室温
试样制备:
1. 称取供试品
取本品水蜜丸,研碎,取0.5g,精密称定;或取小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸,剪碎,混匀,取0.5g,精密称定,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品适量,加甲醇制成每1mL含15mg溶液。
3. 供试品溶液的制备
供试品,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇50mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)45分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
操作步骤:
分别精密吸取对照品溶液10mL和供试品溶液20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长274nm处测定丹皮酚(C9H10O3)的峰面积,计算出其含量。
参考文献:
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p492。