方法名称： 注射用硫酸长春地辛—硫酸长春地辛的测定—高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定注射用硫酸长春地辛中C43H55N5O7·H2SO4的含量。

本方法适用于注射用硫酸长春地辛中硫酸长春地辛的含量测定。

方法原理： 取本品10瓶，分别加水溶解并定量稀释成每1mL中约含0.1mg硫酸长春地辛的溶液，注入液相色谱仪，在270nm波长处检测，记录色谱图。另取对照品加水溶解，同法测定。按外标法以峰面积计算，求得10瓶的平均含量，即得。

试剂： 1. 甲醇

2. 磷酸二氢钾

3. 磷酸

仪器设备： 1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按硫酸长春地辛峰计算一般为2000.。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至6.6）+甲醇=35 65

2.2 检测波长：270nm

2.3 柱温：室温

试样制备： 1. 对照品溶液的制备

精密称取硫酸长春地辛对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg的溶液，摇匀，即为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取本品10瓶，分别加水溶解并定量稀释成每1mL中约含0.1mg硫酸长春地辛的溶液，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μL注入高效液相色谱仪，于270nm波长处测定硫酸长春地辛的吸收值，计算出每瓶含量，求得10瓶的平均含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.720。