热能分析法

1、气相色谱--热能分析法(GC—TEA)

 这种方法能同时定量检测烟草特有亚硝胺(TSAN)和挥发性亚硝胺(VNA)，用于常规分析烟草及相关产品和环境烟气[3]。通常在燃烧器里点燃10支卷烟并使烟气通过Φ92mm剑桥滤片，然后加入二丙基亚硝胺（NDPA）作为内标，再用CH2Cl2萃取、收集、浓缩，过碱性氧化铝柱并用MeOH/CH2Cl2溶液(1∶10)洗脱，最后用GC/TEA检测。

李文寿[4]使用SPB-5大孔毛细管柱(30m×0.53mm)热能分析仪，热分解器的温度控制在475℃，从烟叶中分离，出二甲基亚硝胺(NDMA)、N—亚硝基吡咯(NPYR)、N-亚硝基降烟碱(NNN)、N—亚硝基新烟草碱：(NAT)、亚硝胺酮(NNK)等13种亚硝胺，用剑桥滤片收集烟气后分离出NDMA、NPYR、NNN、NAT、NNK等12种亚硝胺浓度的检测，评价了不同烟气收集方法以及主流和侧流烟气对于亚硝胺测定的影响(表1和表2)，发现NDMA和NNN等亚硝胺在缓冲液、剑桥滤片等回收方法中的回收率接近，但是在主流和侧流烟气中的含量变化却很大：挥发性亚硝胺相差2-80倍，而烟草特有亚硝胺相差2-11倍。在非挥发性亚硝胺的测定中，高效液相色谱和热能分析仪连用(HPLC—TEA)测定亚硝胺不仅无需对样品作衍生化处理，而且选择性很高，正在逐步取代传统的紫外检测器(HPLC—UV)。

分光光度法

2、分光光度(SM)法

以亚硫酰氯或HBr—HOAc等去亚硝基剂打断亚硝胺的N—NO官能团，使之产生NOCl或NOBr被吸收液转化为NO2并显色，测量吸光度后再换算成亚硝胺的含量。该法检测灵敏度高，反应专性强而且快速简便，擅长测定卷烟和卷烟烟气中各种亚硝胺的表观总量。然而，NOBr在吹出过程中会分解成为NO而导致亚硝胺的表观总量偏低。鉴于此，沈彬等[5]改进了该方法，将分解生成的NO再转化成可被分光光度法测定的化合物，并确定了最佳检测条件。亚硝胺表观总量的检出率可达90%—100%，加标回收率为95%。

该方法所需的仪器装置并不复杂：选一支带支管的磨口试管，配备的磨口塞上具有一根通至管底的导气管。置样品溶液于试管中，加入HBr/HOAc溶液，并向反应体系中通入N2。亚硝胺断裂产生的NO被吹离溶液后通过洗气瓶净化、再通过三氧化铬管被氧化成为N02，然后被磺胺—盐酸萘乙二胺吸收液转化为NO2并显色，最后于540nm处测量吸光度A。由NaN02浓度-吸光度标准曲线换算成亚硝胺的含量。