九味羌活丸—黄芩苷的测定—高效液相色谱法

用范围：本方法采用高效液相色谱法测定九味羌活丸中黄芩苷的含量。本方法适用于由羌活、防风、苍术、黄芩、川芎、地黄和细辛等药味组成的浓缩丸制剂。

方法原理：供试品于容量瓶中，加70%乙醇进行超声处理1h，超声后溶液定容进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1、甲醇（色谱纯）

2、乙醇 （分析纯）

3、磷酸（分析纯）

仪器设备：

1、仪器：高效液相色谱仪，色谱柱（十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂），紫外吸收检测器。

2、色谱条件

流动相：甲醇 水 磷酸= 40 60 0.2

检测波长：280nm

柱温：35℃

试样制备：

1、称取供试品：取本品9g，研细，混匀，取约0.75g，精密称定。

2、对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品2mg，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即得（每1ml含黄芩苷约0.04mg）。

3、供试品溶液的制备：将精密称定的样品置150ml容量瓶中，加70%乙醇适量，超声处理1h，取出，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀。离心，去上清液，即得供试液。

操作步骤：

1、标准曲线的绘制：精密吸取上述对照品溶液2、3、4、5、6、7μl 进样,按上述色谱条件测定，以黄芩苷的含量（ X） 为横坐标，其峰面积吸收度积分值（ Y） 为纵坐标，绘制标准曲线。

2、供试品的测定：精密吸取供试品溶液2μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长280nm处测定黄芩苷的吸收值，计算出其含量。