一、实验目的

⑴了解牛奶酸度和钙含量的检测方法及其表示。

⑵了解配位滴定法的原理及方法。

二、实验内容

1.酸度的测定

⑴实验原理

通过测定牛奶的酸度即可确定牛乳的新鲜程度，同时可反映出乳质的实际状况。

乳的酸度一般以中和100mL牛乳0.1mol·L-1氢氧化钠溶液的毫升数来表示，正常牛乳的酸度随乳牛的品种、饲料、泌乳期的不同而略有差异，但一般均在14～18°T之间。如果牛乳放置时间过长，因细菌繁殖而致使牛乳酸度降低。因此牛乳的酸度是反映乳质量的一项重要指标。

⑵试剂及仪器

试剂：1%酚酞指示剂，0.1mol·L-1氢氧化钠标准溶液，pH=6.88标准缓冲溶液。

仪器：量筒、锥形瓶、碱式滴定管、pHS-25型酸度计。

⑶测定方法

①滴定法

量取50mL鲜乳，注入250mL锥形瓶中，用50mL中性蒸馏水稀释，加入1%酚酞指示剂5滴，混匀。用0.1mol·L-1氢氧化钠标准溶液（如何标定？）滴定，不断摇动，直至微红色在1min内不消失为止。计算酸度以100mL牛乳消耗的NaOH克数表示，或量取250mL酸牛乳，充分搅拌均匀，然后准确称取此酸牛乳15～20g于250mL锥形瓶中，加入50mL热至40℃的蒸馏水（摇匀），加0.1%酚酞指示剂3滴，用0.1mol·L-1NaOH标准溶液滴至微红色在30s内不消失，即为终点，重复三次，计算酸度（以100g酸牛奶消耗的NaOH的克数表示）。

②酸度计法

按照pH计的使用说明用标准缓冲溶液pH=6.88定位，用蒸馏水洗净电极，擦干。取50mL鲜牛奶放入100mL烧杯中，在酸度计上测定pH值。

2.钙含量的测定

⑴实验原理

测定牛奶中的钙采取配位滴定法，用二乙胺四乙酸二钠盐（EDTA）溶液滴定牛奶中的钙。用EDTA测定钙，一般在pH=12～13的碱性溶液中，以钙试剂（络蓝黑R）为指示剂，计量点前钙与钙试剂形成粉红配合物，当用EDTA溶液滴定至计量点时，游离出指示剂，溶液呈现蓝色。

滴定时Fe、Al干扰时用三乙醇胺掩蔽。

⑵试剂及仪器

试剂：EDTA标准溶液（0.02mol·L-1）、NaOH（20%）、铬蓝黑R（0.5%）或MgY-EBT作指示剂。

仪器：移液管（25mL）、锥形瓶（250mL）、滴定管。

⑶实验步骤

⑴EDTA溶液的标定（用标准锌溶液标定）

⑵钙含量的测定

准确移取牛奶试样25.00mL三份分别加入250mL锥形瓶中，加入蒸馏水25mL，加入2mL20%NaOH溶液，摇匀、再加入10～15滴铬蓝黑R指示剂，用标准EDTA滴定至溶液由粉红色至明显灰蓝色，即为终点，平行测定三次，计算牛奶中的含钙量，以每100mL牛奶含钙的毫克数表示。将纯鲜牛奶换成高钙牛奶，重复做三次，计算高钙牛奶中的含钙量。