1、涂片镜检：根据脓、痰涂片和压片检查，可见有革兰阳性和部分抗酸性分枝菌丝若见散在的抗酸性杆菌，应与结核分枝杆菌相区别。
2、分离培养：标本接种分离可用沙保培养基或脑心浸液琼脂平板置37℃培养。因星形诺卡菌在 45℃时生长，故温度可有初步鉴别意义。培养24—48h后有小菌落缓慢出现，淡黄色粗颗粒样，边缘陷入培养基中，表面干燥，白色或淡黄色。时间延长则菌落皱折、堆叠如皮革样，表面有天鹅绒样气中菌丝体。需注意，诺卡菌入侵肺部后由于巨噬细胞等免疫因素的作用下可使之变为L型。因此，常需反复检查才能证实医学教育`网搜集整理。有人将豚鼠诺卡菌注入112只小鼠鼻腔均能引起急性致死性肺炎。死鼠肺匀浆接种在心脑浸液琼脂平板不易分离出病原菌，但在高渗培养基上均能分离出L型。
3、生化鉴定：利用API20系统进行鉴定。
4、其他检查：X线检查或其他影像检查可发现器官局部病变。
