温度对酶活性影响有双重性。
一般说来在25～35℃之间随温度升高酶促反应加快。酶的Ql0值约在1.5～2.5。
Ql0值即温度增加l0℃化学速度的变化率。
温度继续升高可使酶变性，反应速度下降。在最适温度时，反应医学教育网整理速度最快。
不同的温度酶反应的速率不同，可直接影响测定结果。为保证最适温度要在恒温条件下进行，温度波动要控制在±1℃。
37℃是目前使用最广泛的测定酶催化活性的温度。目前在常规实验室中广泛使用半自动全自动生化分析仪，有高效率的恒温系统，使反应系统很快升温并维持在37℃，可避免温度差医学教育网整理异引起的误差。
