苷键被稀酸催化水解，反应一般在水中或者烯醇中进行，所用的酸有盐酸、硫酸、乙酸和甲酸等。苷发生酸催化水解反应的机理是：苷键原子首先发生质子化，然后苷键断裂生成苷元和糖的阳碳离子中间体，在水中阳碳离子经溶剂化，再脱去氢离子而形成糖分子。
酸催化水解的难易与苷键原子的碱度医学|教育网搜集整理，即苷原子上的电子云密度以及其空间环境有密切关系。只要有利于苷元质子化的因素，就能有利于水解的进行。苷类酸水解的难易有以下规律：
a.按苷原子的不同，苷类酸水解的易难顺序是：N-苷键>O-苷键>S-苷键>C-苷键。
b.呋喃糖苷较吡喃糖苷容易水解
c.酮糖苷较醛糖苷易于水解
d.羟基糖较氨基糖易于水解
