糖异生过程中的关键酶有好几个，它们在不同的步骤中起着重要作用。其中最重要的四个关键酶分别是：
1. 丙酮酸羧化酶 这个酶催化了丙酮酸转化为草酰乙酸的过程，这是糖异生途径的第一步，而且是一个不可逆反应。
2. 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK） 它负责将草酰乙酸转化成磷酸烯醇式丙酮酸，这个步骤也是不可逆的，并且消耗了高能磷酸键。
3. 果糖-1,6-二磷酸酶 这个酶催化果糖-1,6-二磷酸水解生成果糖-6-磷酸，这是一个重要的调控点，因为此反应是可逆的糖酵解途径中的关键步骤的逆过程。
4. 葡萄糖-6-磷酸酶 它将葡萄糖-6-磷酸转化为游离的葡萄糖分子，这是最终一步，使得新生成的葡萄糖能够离开细胞。
这些酶在肝脏和肾脏等组织中特别活跃，对于维持血糖水平稳定非常重要。
