难逆性抗胆碱酯酶药物主要通过与乙酰胆碱酯酶形成稳定的共价键，导致酶活性位点的永久性失活，从而长时间抑制酶的活性。这类药物的作用机制可以分为几个步骤：
首先，这些药物分子能够进入神经突触间隙，并迅速与乙酰胆碱酯酶（AChE）的活性中心结合。这个过程类似于可逆性抗胆碱酯酶药的作用方式，但不同之处在于难逆性药物一旦与酶结合后，会形成一个非常稳定的复合物。
其次，在此复合物中，药物分子上的特定基团（如磷酰基、氰酸酯等）能够通过化学反应与乙酰胆碱酯酶活性中心的丝氨酸残基发生不可逆的共价键连接。这种类型的键合使得复合物难以被水解或以其他方式分解，因此即使在长时间内也很难恢复酶的正常功能。
最终结果是乙酰胆碱（ACh）无法被有效降解，导致其在突触间隙内的浓度显著升高，并持续激活受体，产生强烈的生理效应。由于难逆性抗胆碱酯酶药物对酶的作用持久且难以逆转，它们的应用需要特别谨慎，通常仅用于特定疾病治疗或者作为研究工具。
总之，难逆性抗胆碱酯酶药通过与乙酰胆碱酯酶形成稳定的共价键合来阻止该酶的正常工作，进而影响神经递质乙酰胆碱的作用过程。
