布鲁菌属的生物学形状及微生物学检验是临床检验主管技师《微生物学》大纲要求考生掌握的考点,医学教育网对词考点做了整理,希望对大家的复习有帮助。
生物学性状
形态与染色:
革兰阴性小球杆菌或短杆菌。无鞭毛,无芽胞,光滑型菌株有荚膜。革兰染色经常着色不佳,吉姆染色呈紫色。
培养特性:
专性需氧。初次分离培养时需5%~10%CO2.生长缓慢,营养要求高,最适生长温度为35℃~37℃,最适pH为6.6~6.8.在血琼脂平板或肝浸液琼脂平板上,37℃培养48h长出透明、无色、光滑型(S型)小菌落。血琼脂平板上无溶血现象。
能分解尿素和产生H2S.
根据产生H2S的多少和在含碱性染料培养基中的生长情况,可鉴别三种布鲁菌。
抗原构造与分型:
布鲁菌含有两种抗原物质:A抗原和M抗原。三种布鲁菌所含的A抗原与M抗原量在比例上不同。用A血清与M血清进行凝集试验对三种布鲁菌有鉴别作用。医学/教育网牛布鲁菌A:M=20:1;羊布鲁菌A:M=1:20;而猪布鲁菌A:M=2:1.
抵抗力:
布鲁菌对日光、热、常用消毒剂等均很敏感。日光照射10~20min,湿热60℃10~20min,在普通浓度的来苏溶液中数分钟即被杀死。但其在外界环境中的抵抗力较强,在水中可生存4个月,在土壤、皮毛和乳制品中可生存数周至数月。对常用的广谱抗生素较敏感。
微生物学检查
急性期取血,慢性期取骨髓。将材料接种双相肝浸液培养基(一半为斜面,一半为液体)置37℃、5%~10À2环境中培养。大多在4~7d形成菌落,若30d时仍无菌生长可报告为阴性。可通过菌落特点、涂片染色镜检、CO2的要求、H2S产生、染料抑菌试验及玻片凝集等确定型别。
病后1周后,可用试管凝集试验测定血清IgM抗体。抗体效价≧1:160~1:320为阳性,1:200有诊断意义,但当大于或等于1:100时应重复进行试管凝集试验,需要在37℃水浴16~20小时后观察结果。用乳胶凝集试验可在6分钟内判定结果。抗球蛋白试验(Coombs试验)针对布鲁菌感染者出现不完全抗体者,在病程中凝集效价出现增长者有诊断意义。对慢性患者可进行补体结合试验测IgG,一般以1:10为阳性诊断标准,一般发病三周后出现IgG抗体。将布鲁菌素0.1ml注入受试者前臂掌侧皮内24~48h观察结果。局部出现红肿,直径1~2cm为弱阳性,大于2cm~3cm者为阳性,大于3~6cm为强阳性。若红肿在4~6h内消退者为假阳性。皮试阳性可诊断慢性或曾患过布鲁菌病。
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