问题索引：

1.【问题】PCR实验室的污染来源有哪些？

2.【问题】豚鼠采血的方法有哪些？

3.【问题】牛鲍计数板稀释倍数怎样计算？

具体解答：

1.【问题】PCR实验室的污染来源有哪些？

【解答】①样本间交叉污染：收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢；不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖；移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌；不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散，相互交叉污染。

②实验试剂污染：主要是在PCR组分试剂加[医学教育网原创]样过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。加样过程中，因为PCR试剂对温度十分敏感，需要通过冰浴使得PCR试剂和PCR板/管处于OC，但这个过程也是充满了污染的风险的。

③扩增产物污染：大量拷贝的产物泄[医学教育网原创]漏或扩增后的PCR反应管意外开盖，这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可形成假阳性。

④克隆质粒污染：作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

2.【问题】豚鼠采血的方法有哪些？

【解答】豚鼠采血方法如下：

①耳缘切口采血：先将豚鼠耳消毒，用刀片[医学教育网原创]沿血管方向割破耳缘，切口约长0.5cm，在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液，防止血凝，则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml。

②背中足静脉采血：固定豚鼠，将其右或左后[医学教育网原创]肢膝关节伸直，脚背消毒，找出足静脉，左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手将注射针刺入静脉，拔针后立即出血。

③心脏采血：用手指触摸，选择心跳最明显的部位，把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。

3.【问题】牛鲍计数板稀释倍数怎样计算？

【解答】例如：因为要稀释血液，用2ml的稀释[医学教育网原创]液稀释10μl的血液，即加入稀释液和血液后总的量变成2010μl。所以要用总量除以稀释前的血液量即为稀释倍数。

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