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胸腔、腹腔和心包腔积液检查的化学检查

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1.蛋白质

(1)检测原理

1)黏蛋白定性检验:又称Rivalta试验。浆膜间皮细胞在炎症反应刺激下分泌黏蛋白增加,黏蛋白是一种酸性糖蛋白,其等电点为pH3~5,在稀乙酸溶液中产生白色雾状沉淀。

2)蛋白质定量检验:浆膜腔积液中蛋白质定量,采用与血清蛋白质相同的双缩脲法测定。积液蛋白电泳可对积液的蛋白组分进行分析。

(2)参考值

Rivalta试验:漏出液阴性;渗出液阳性。

蛋白质定量:漏出液<25g/L;渗出液>30g/L。

(3)方法学评价:Rivalta试验是一种简便快速过筛试验,无需特殊仪器,但只能测定黏蛋白,积液蛋白质定量可测定清蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等蛋白质的含量,蛋白电泳可对蛋白组分进行分析,故蛋白质定量和蛋白电泳有助于积液的性质判断。

(4)质量控制

1)血性浆膜腔积液:应离心取上清液进行蛋白质定性或定量试验。

2)Rivalta试验:

①试剂:蒸馏水加入冰乙酸后应充分混匀。

②观察:加入标本后,应在黑色背景下观察,如浑浊不明显或中途消失,为阴性。

③标本中球蛋白量过高:如肝硬化腹水,Rivalta试验可呈假阳性。可用下述方法鉴别:将标本滴入未加冰醋酸的蒸馏水中,可出现白色雾状沉淀(球蛋白不溶于水)。

④阳性对照:人工配制含黏蛋白的溶液,可按漏出液成分配制基础液并加入不同量的黏蛋白。

(5)临床意义:积液中蛋白质的变化对鉴别渗出液和漏出液及寻找积液的原因有重要意义。

2.葡萄糖

(1)检测原理:多采用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法。

(2)参考值:①漏出液:较血糖稍减低;②渗出液:3.6~5.5mmol/L

(3)临床意义 葡萄糖减低

2)鉴别腹水的性质:

结核性腹水中葡萄糖与血糖比值为0.25~0.93;肝硬化腹水中葡萄糖与血糖比值为1.00~3.68。

3.酶学

(1)乳酸脱氢酶(LD)

1)参考值:漏出液:LD<200U/L,积液LD/血清LD<0.6。

渗出液:LD>200U/L,积液LD/血清LD比值>0.6。

2)临床意义:①LD活性增高见于化脓性积液、恶性积液、结核性积液等。化脓性积液LD活性增高最明显,且LD增高程度与感染程度呈正相关;其次为恶性积液;结核性积液LD略为增高。②如果积液LD/血清LD比值大于1.0,则为恶性积液,这是由于恶性肿瘤细胞分泌大量LD,致使积液LD活性增高。

(2)溶菌酶(lysozyme,LZM)

1)参考值:0~5mg/L。

2)临床意义:LZM活性增高见于感染性积液。恶性积液与血清LZM比值小于1.0;94%的结核性积液的LZM含量大于30mg/L,且积液与血清LZM比值大于1.0,明显高于恶性积液、结缔组织病性积液。

(3)腺苷脱氨酶

目前采用比色法或紫外分光光度法检测腺苷脱氨酶(ADA)。

1)参考值:<45U/L。

2)临床意义:①鉴别结核性和恶性积液:ADA活性增高主要见于结核性、风湿性积液,而恶性积液、狼疮性积液次之,漏出液最低。结核性积液ADA活性可髙于100U/L,其对结核性积液诊断的阳性率可达99%。②观察疗效:当经抗结核药物治疗有效时,其ADA活性随之减低。因此,ADA活性可作为抗结核治疗时疗效观察的指标。

4.免疫学检查

(1)C-反应蛋白(CRP) 感染性和恶性积液CRP含量明显增高。因此,CRP对诊断感染性、恶性积液及鉴别渗出液和漏出液有重要价值。漏出液CRP<10mg/L,渗出液CRP>10mg/L,其灵敏度和特异性均为80%左右。

(2)肿瘤标志物

1)癌胚抗原:癌胚抗原(CEA)常采用ELISA、放射免疫或化学发光法检测。恶性积液CEA明显增高。当积液中CEA>20μg/L,积液CEA/血清CEA比值>1.0时,应高度怀疑为恶性积液,且CEA对腺癌所致的积液诊断价值最高。

2)甲胎蛋白(AFP):常用ELISA、放射免疫或化学发光法检测AFP。血清AFP对原发性肝癌和胚胎性肿瘤的诊断价值较大。积液中AFP含量与血清浓度呈正相关,当腹腔积液AFP>300μg/L时,对诊断原发性肝癌所致的腹水有重要价值。

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