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1.预先按照一定比例将亲和素(或链霉亲和素)与酶标生物素结合,形成可溶性的亲和素(或链霉亲和素)-生物素-过氧化物酶复合物。
2.当其与反应体系的生物素化抗体相遇时,复合物中未饱和的亲和素(或链霉亲和素)结合部位即可与抗体上的生物素结合。
3.亲和素与生物素间极高的亲和力,使反应结合更牢固稳定,而且特异性高。每个亲和素可结合4个生物素,可同时结合多价性的生物素化衍生物,这样就形成多级放大作用。
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