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粪便检查以检出钩虫卵或孵化出钩蚴是确诊的依据，常用的方法有直接涂片法：简便易行，但轻度感染者容易漏诊，反复检查可提高阳性率；饱和盐水浮聚法：钩虫卵比重约为1.06，在饱和盐水（比重为1.20）中，容易漂 。检出率明显高于直接涂片法，在大规模普查时，可用15％、20％的盐水，其检查效果与饱和盐水相同；钩蚴培养法：检出率与盐水浮聚法相似，此法可鉴定虫种，但需培养5～6天才能得出结果。此外，饱和盐水浮聚法、钩蚴培养法，亦可进行定量检查。
免疫诊断方法应用于钩虫产卵前，并结合病史进行早期诊断。方法有皮内试验、间接荧光抗体试验等，但均因特异性低而少于应用。
在流行区出现咳嗽、哮喘等，宜作痰及血液检查，如痰中有钩蚴及表现小细胞低色素性贫血可确诊为钩虫病。
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