摄入过多的维生素会从尿中排出，故可利用测定尿中的维生素负荷来估计体内维生素负荷的状态因为硫胺素的需要量与其尿排泄量之间具有一定的关系因此硫胺素负荷试验可以测定硫胺素的营养状况。通常用荧光法或微生物法进行硫胺素的测定被测者于清晨排尿后禁食给维生素B1(口服5mg或肌注1mg)，然后饮水200ml收集4h尿，测定尿中维生素负荷量。若在100µg以上者为正常；脚气患病常低于50µg。因为游离硫胺素及其磷酸盐的含量很低，故测硫胺素水平作为硫胺素营养状况的指标一直未被广泛采用，但是最近采用灵敏的高效液相色谱法，此方法简单而可靠易于标准化但因其参考值幅度较广，含量不稳定，不能及时反映早期缺乏状况，故临床很少采用。正常参考值为103～306nmol/L(3.1～9.2µg/dl)如硫胺素水平<100nmol/L(3µg/dl)则提示维生素缺乏三测定尿液中硫胺素/肌酐比率 空腹一次测定尿液中硫胺素/肌酐比率其正常值为176µg/g肌酐，幼儿如低于120µg/g肌酐，4～12岁小儿低于60µg/g肌酐，则为维生素缺乏。
