（1） 取本品，置显微镜下观察：淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24～40μm,脐点短缝状或人字状。不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm 。薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。草酸钙针晶成束或散在，长26～110μm。草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中，有时数个排列成行。果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁略连珠状增厚。薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群。纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚。（2） 取本品水蜜丸6g，研碎；或取小蜜丸或大蜜丸9g，切碎。加乙醚15ml，振摇15分钟，放置1 小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml 使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml 含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上使成条状，以环己烷－醋酸乙酯（3:1） 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性 5%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色条斑。
（3） 取本品2g，切碎，加甲醇5ml ，加热回流15分钟，滤过，取滤液，补加甲醇使成5ml ，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml 含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯－醋酸乙酯－甲醇－异丙醇－浓氨试液（12:6:3:3:1）为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm） 下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。
含量测定
取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取水蜜丸6g或小蜜丸12g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取12g，精密称定。加水30ml，放置使溶散，滤过，药渣用水30ml洗涤，在室温干燥至呈松软的粉末状，在100℃烘干，连同滤纸一并置索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流提取4小时，提取液回收乙醚至干，残渣用石油醚（30～60℃）浸泡2次，每次15ml（浸泡约2分钟），倾去石油醚，残渣加适量无水乙醇-氯仿（3:2）的混合液，微热使溶解，转移至5ml量瓶中，加上述混合液至刻度，摇匀,作为供试品溶液。另精密称取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，精密吸取供试品溶液5μl、对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸（20:5:8:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热5～7分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法（附录Ⅵ B薄层扫描法）进行扫描，波长：λs=520nm，λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。本品含山茱萸以熊果酸（C30H48O3）计，水蜜丸每1g不得少于0.15mg，小蜜丸每1g不得少于0.090mg，大蜜丸每丸不得少于0.81mg。
测定方法
方法名称：
知柏地黄丸－丹皮酚的测定－高效液相色谱法。
应用范围：
本方法采用高效液相色谱法测定知柏地黄丸中丹皮酚的含量。
本方法适用于中成药知柏地黄丸。
方法原理：
本品加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算出其含量。
试剂：
本品加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算出其含量。
甲醇
仪器设备：
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按丹皮酚峰计算应不低于3500。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相：甲醇 水=70 30
2.2检测波长：274nm
2.3柱温：室温
试样制备：
1. 称取供试品
取本品水蜜丸，研碎，取0.4g，精密称定；或取小蜜丸或重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取0.5g，精密称定，为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1mL含15mg溶液。
3. 供试品溶液的制备
供试品，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
操作步骤：
分别精密吸取对照品溶液10mL和供试品溶液20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长274nm处测定丹皮酚（C9H10O3）的峰面积，计算出其含量。
参考文献：
中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p494。
