1、用药前须做青霉素皮肤试验，阳性者禁用。
2、美洛西林与青霉素类药物有交叉过敏。交叉过敏反应：对一种青霉素类抗生素过敏者可能对其他青霉素类抗生素也过敏。也可对青霉胺或头孢菌素类过敏。 对美洛西林过敏者禁用；对其它任何一种青霉素类药物过敏者禁用。
3、慎用于以下情况
（1）凝血功能异常患者慎用。
（2）对头孢菌素类药或其它过敏原过敏患者慎用。
（3）严重肝、肾功能障碍者慎用。
（4）有哮喘、湿疹、枯草热、荨麻疹等过敏性疾病史者。
4、使用美洛西林时，可使尿糖试验(Clinitest法)出现假阳性；在美洛西林治疗期间尿蛋白试验结果可呈现阳性；少数患者用药后可出现白细胞总数减少、血小板降低、嗜酸粒细胞增多；血钾降低；血清转氨酶(天门冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶)升高。
5、长期用药时应常规检测肝、肾功能及血象；长期大剂量用药时应监测血钾浓度。
6、对诊断的干扰：(1)用药期间，以硫酸铜法进行尿糖测定时可出现假阳性，用葡萄糖酶法者则不受影响；(2)大剂量注射给药可出现高钠血症；(3)可使血清丙氨酸氨基转移酶或门冬氨酸氨基转移酶升高。
