照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录Ⅵ D)测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(75:25)为流动相;检测波长286nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1ml含10ng的溶液,即得。 供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物,研匀,精密称取约1g,置100ml锥形瓶中,加甲醇30ml,置水浴上回流30分钟,放冷,滤入50ml量瓶中,用甲醇20ml分次洗涤残渣及滤器,洗液并入容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,精密量取20ml,蒸干,残渣加盐酸溶液(1:10)10ml,置水浴中回流20分钟,立即冷却,用乙醚振摇提取4次(20ml、20ml、10ml、10ml),合并乙醚液,蒸干,残渣加甲醇定量转移至10ml量瓶中,摇匀,离心,取上清液,即得。 测定法 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。 本品每粒含大黄素(C15H10O5)不得少于0.20mg。