1.研究M3受体激动剂毛果芸香碱对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

方法：采用Langendorff灌注系统，建立离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.观察毛果芸香碱5μmol·L-1对复灌后冠脉流量、心肌丙二醛（MDA）含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD）活性和心肌梗死面积的影响.结果 毛果芸香碱改善缺血再灌注后的冠脉流量，其中5 min(P<0.01）和10min(P<0.05）的冠脉流量增加显著；降低心肌MDA含量（P<0.05）并提高心肌SOD活性（P<0.05）；缩小心肌梗死面积（P<0.05).上述作用可被选择性M3受体阻断剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide(4-DAMP)3 nmol·L-1所逆转.结论：M3受体激动剂毛果芸香碱通过激动心肌M3受体而对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤起保护作用.

2.探讨长期应用毛果芸香碱对兔眼角膜内皮细胞有无影响及影响方式。

方法：用2%的毛果芸香碱给兔滴眼1个月和3个月后，取下兔眼球迅速固定，分离角膜内皮组织，用蛋白印迹（Western?blot）法检测兔眼角膜内皮细胞中抗凋亡基因bcl?2蛋白及凋亡基因bax蛋白的表达，流式细胞仪检测角膜内皮细胞的凋亡率，透射电镜下观察各组角膜内皮细胞的超微结构变化。结果：应用毛果芸香碱1个月及3个月后，均呈现兔眼角膜内皮细胞凋亡基因bax蛋白表达增多，抗凋亡基因bcl?2蛋白表达减少，3个月组兔眼角膜内皮细胞凋亡率高于对照组（P<0.05），透射电镜下观察可见，1个月及3个月组细胞内空泡形成，线粒体肿胀，内质网扩张，细胞核固缩，染色质固缩周边化等典型凋亡改变。结论：长期应用2%的毛果芸香碱可以诱导兔眼角膜内皮细胞发生凋亡。

3.对比研究1%毛果芸香碱脂质体滴眼液与1%毛果芸香碱滴眼液对兔眼的缩瞳作用。

方法； 家兔18只，随机分为实验组、阳性对照组、阴性对照组。实验组应用1%毛果芸香碱脂质体滴眼液，阳性对照组应用1%毛果芸香碱滴眼液，阴性对照组应用空白脂质体滴眼液。各组家兔左眼滴人滴眼液，右眼滴人生理盐水作为空白对照，分别在给药前。给药后0．25、0．5、1、2、3、4、5、7h测量瞳孔直径。结果 :3组滴药前瞳孔直径左右眼比较，差异无显著性（P>0．05）。滴药后0．25h，阳性对照组缩瞳作用最大（P<0．01），滴药1h瞳孔开始散大，滴药后5h差异无显著性（P>0．05）；实验组滴眼后0．5h瞳孔最小（P<0．01），3h瞳孔开始散大，7h差异无显著性（P>0．05）；阴性对照组在观察的7h内无差异（P>0．05）。结论：1%毛果芸香碱脂质体滴眼液具有缓慢释药，延长作用时间的优点。

4.对2%毛果芸香碱微乳滴眼剂与2%毛果芸香碱滴眼液在兔房水中的药代动力学进行对比研究。

方法：健康白兔60只，随机分成20组，10个实验组，10个对照组，每组3只兔（6只眼）。对各实验组双眼结膜囊内准确滴入2%毛果芸香碱微乳滴眼剂50 μl，对各对照组双眼同法滴入2%毛果芸香碱滴眼液50 μl，分别于给药后5、10、30、40、60、90、120、180、240及360 min时抽取房水。用二氯甲烷提取房水中的药物，采用反相高压液相色谱（high pressure liquid chromatography,HPLC）法测定房水中的药物浓度。结果： 用反相HPLC法可以将毛果芸香碱与其它杂质分离，最低检测浓度为0.01 mg/L。2%毛果芸香碱微乳滴眼剂或滴眼液50 μl滴眼后，除5 min时间点外，其余各时间点毛果芸香碱微乳滴眼剂治疗组的房水药物浓度较毛果芸香碱滴眼液治疗组明显增高（P=0.000 3～0.042）。微乳滴眼剂的药-时曲线下面积是滴眼液的3倍，微乳滴眼剂的生物利用度比滴眼液高2倍。用微乳滴眼剂后6 h，房水中仍可测出毛果芸香碱的浓度，而用滴眼液后3 h，房水中已测不出毛果芸香碱的浓度。结论： 将毛果芸香碱滴眼液的剂型改为微乳滴眼剂可明显提高毛果芸香碱的生物利用度，增强疗效，减少用药频率，提高青光眼的治疗指数，具有较好的应用前景。