方法名称：水飞蓟－水飞蓟宾或异水飞蓟宾－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定水飞蓟中水飞蓟宾或异水飞蓟宾的含量。

本方法适用于菊科植物水飞蓟Silybum marianum (L.) Gaertn.的干燥成熟果实。

方法原理：本品粉末置具塞锥形瓶中，加75%甲醇加热回流，放冷，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，上清夜进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长287nm处检测水飞蓟宾、异水飞蓟宾的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1．甲醇

2．冰醋酸

仪器设备：

1．仪器

1．1高效液相色谱仪

1．2色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按水飞蓟宾或异水飞蓟宾峰计算应不低于5000。

1．3 紫外吸收检测器

2．色谱条件

2．1流动相：甲醇水 冰醋酸=48 52 1

2．2检测波长：287nm

2．3柱温：室温

试样制备：

1．称取供试品

精密称取本品粉末（过三号筛）0.5g, 为供试品。

2．对照品溶液的制备

精密称取水飞蓟宾和异水飞蓟宾混合对照品12mg，置50mL量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取5mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

3． 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加75%甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。

操作步骤：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长287nm处测定水飞蓟宾（C25H22O10）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p56。