方法名称：

脑得生片－人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的测定－高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定脑得生片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。

本方法适用于中成药脑得生片。

方法原理：

本品经超声处理，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长203nm处检测人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的吸收值，计算出其含量。

试剂：

1.乙腈

2.正丁醇

3..氨试液

4 ,甲醇

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按人参皂苷Rg1计算应不低于8000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈为流动相A，水为流动相B

时间（分钟）

流动相A（%）

流动相B（%）

0~20

20→40

80→60

20~26

20

80

2.2检测波长：203nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 称取供试品

取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取约1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品、三七皂苷R1对照品适量，分别加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rb10.75mg、人参皂苷Rg10.75mg、三七皂苷R10.15mg的混合溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品，置具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇50mL，密塞，超声处理（功率250W，频率33kHz）20分钟，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，置分液漏斗中，加氨试液洗涤2次（15 mL，10 mL），取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长203nm处测定人参皂苷Rg1（C42H72O14）、人参皂苷Rb1（C54H92O23）、三七皂苷R1（C47H80O18）的峰面积，计算出其含量。

参考文献：

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p572。