对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品8mg,置10ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置25ml量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,即得(每1ml含盐酸小檗碱32μg)。 标准曲线的制备 分别精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml置10ml量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液至刻度,摇匀。以0.1mol/L盐酸溶液为空白。照分光光度法(中国药典2000年版一部附录Ⅴ A),在345nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。 供试品溶液的制备 取本品500片,精密称定,研细,取约24g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率160W,频率50kHz)30分钟,时时振摇,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,放置,滤过,精密量取续滤液10ml置中性氧化铝柱(5g,内径约1cm,湿法装柱,用乙醇30ml预洗)上,用乙醇洗脱,收集洗脱液于50ml量瓶中,至洗脱液近刻度时为止,加乙醇至刻度,摇匀,即得。 测定法 精密量取供试品溶液2ml,置10ml量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加0.1mol/L盐酸溶液至刻度”起,依法测定吸收度,计算,即得。 本品每片含总生物碱以盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)计,不得少于0.20mg。