照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。
色谱条件与系统适用性试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-0.4%磷酸 溶液(13:87)为流动相;检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算不低于1000。 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成 每1ml含4μg的溶液,即得(10℃以下保存)。
于华忠等采用紫外可见分光光度法测定杜仲叶中绿原酸含量,其稳定性好、重复性好,回收率为104. 2 %。绿原酸在5. 05~ 40. 4 Lg/ ml之间,其吸光度$A= A325- A345与浓度呈良好线性关系。此方法简便、快速、准确、 稳定,可用于杜仲叶片绿原酸含量的测定。
方法名称: 银翘双解栓-绿原酸的测定-高效液相色谱法
应用范围
本方法采用高效液相色谱法测定银翘双解栓中绿原酸的含量。
本方法适用于中成药银翘双解栓。
方法原理
本品加热水溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长324nm处检测绿原酸的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1. 甲醇,2. 冰醋酸;
仪器设备
1 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇 水 冰醋酸 =15 85 1
2.2检测波长:324nm
2.3柱温:室温
试样制备
1. 称取供试品
取重量差异项下的本品,剪碎,混匀,取约0.5g,精密称定,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加水制成每1mL含10mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
取重量差异项下的本品,剪碎,混匀,取约0.5g,精密称定,置锥形瓶中,加热水40mL使溶解,放冷,滤过,滤液置100mL量瓶中,容器与滤器用热水洗涤2次(30mL,20mL),洗液并入同一量瓶中.加水至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
操作步骤
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长324nm处测定绿原酸(C16H18O9)的峰面积,计算出其含量。