苄星青霉素
Bianxingqingmeisu
Benzathine Benzylpenicillin
书页号：中国药典2005年版二部-227
[修订]
本品为（2S,5R,6R）-3,3-二甲基-7-氧代- 6-（2-苯乙酰氨基）-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸的N，N´-二苄基乙二胺盐四水合物，或加适量缓冲剂及助悬剂制成的无菌粉末。按无水物计算，含二苄基乙二胺（C16H20N2）应为24.0%～27.0%，含青霉素（C16H18N2O4S）应为69.9%～75.0%，每1mg含青霉素应为1244～1335单位。
【鉴别】 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液两个主峰的保留时间应分别与苄星青霉素对照品溶液中相应两个主峰的保留时间一致。
有关物质 精密称取本品约70mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml振摇使均匀分散后，加甲醇10ml充分振摇使溶解，立即用磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g与磷酸氢二钾1.14g，加水溶解并稀释成1000ml）稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（临用前现配）；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用上述磷酸盐缓冲液稀释至刻度，作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录V D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（端基封尾）；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.1），流动相B为甲醇，流速为每分钟1.0ml，线性梯度洗脱；柱温为40℃；检测波长为220nm。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使青霉素峰的峰高约为满量程的20%，再取供试品溶液及对照溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液两主峰面积之和的2倍（2.0%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液两主峰面积之和的3.5倍（3.5%）。（供试品溶液中任何小于对照溶液两主峰面积之和0.05倍的峰可忽略不计）
| 时间（分钟） |
流动相A (%) |
流动相B (%) |
| 0
30
55
55.1
70
|
75
35
35
75
75
|
25
65
65
25
25
|
抽针试验 取本品1.0g，加水4ml，摇匀，用装有5 号针头的注射器抽取，应能顺利通过，不得阻塞。
可见异物 取制剂项下的最大规格量5份，分别加二甲基甲酰胺适量溶解后，依法检查（附录IX H），应符合规定。
无菌 取本品，加入4倍于样品标示单位的无菌青霉素酶，再加灭菌水制成12万单位/ml混悬液，摇匀，静置30分钟后，采用直接接种法，取2 ml，接种于40ml含0.5%聚山梨酯-80培养基中摇匀，培养，每日观察后振摇均匀；以枯草芽孢杆菌为阳性对照菌，依法检查（附录Х? H），应符合规定。
【含量测定】 照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（端基封尾）；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至5.1）－乙腈（83:17）为流动相；流速为每分钟1ml；检测波长为220nm。理论板数按青霉素峰和二苄基乙二胺峰计算均应不低于3000。
测定法 精密称取本品约35mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml振摇使均匀分散后，加甲醇10ml充分振摇使溶解，立即用磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g与磷酸氢二钾1.14g，加水溶解并稀释成1000ml）稀释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取苄星青霉素对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中青霉素（C16H18N2O4S）和二苄基乙二胺（C16H20N2）的含量。每1mg的C16H18N2O4S相当于1780青霉素单位。
【鉴别】 （2）颜色反应
【检查】 二苄基乙二胺，改用HPLC法同时测定，方法验证见含量测定项下
