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喹诺酮类通过抑制DNA螺旋酶作用，干扰DNA超螺旋结构的结旋，阻碍DNA合成而导致细菌死亡。
哺乳动物的细胞内也含有生物活性与细菌DNA螺旋酶相似的酶，称为拓朴异构酶Ⅱ。氟喹诺酮类药对人体细胞拓朴异构酶Ⅱ影响较小，不影响人体细胞生长。
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