1.直接涂片
(1)悬滴标本检查:取新鲜粪便于载玻片上,加生理盐水混合后,上覆盖玻片置显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。脑脊液经3000r/min离心沉淀15min后,制成涂片做悬滴检查。
(2)革兰染色检查: 为革兰氏阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。
2.分离培养
粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板,如改良的Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72小时,观察菌落特征。
3.鉴定
(1)属的鉴定特征:革兰氏阴性细小弯曲杆菌,单鞭毛具有投镖样或螺旋样动力,需氧环境不生长,微需氧条件下,在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性、革兰氏阴性、菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、42℃)试验、过氧化氢试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等等。
(2)种和亚种鉴定:见表
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触酶 |
25℃生长 |
43℃生长 |
1%甘氨酸 |
H2S |
马尿酸 |
3.5%NaCl |
脲酶 |
胎儿弯曲菌 |
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? |
? |
? |
? |
? |
? |
? |
胎儿亚种 |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
? |
? |
- |
性病亚种 |
+ |
+ |
- |
- |
- |
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? |
- |
空肠弯曲菌 |
+ |
- |
+ |
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? |
+ |
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大肠弯曲菌 |
+ |
- |
+ |
? |
? |
- |
? |
- |
痰液弯曲菌 |
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? |
? |
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牛亚种 |
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+ |
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? |
? |
+ |
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痰液亚种 |
- |
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+ |
+ |
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? |
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黏膜亚种 |
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+ |
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? |
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简明弯曲菌 |
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- |
- |
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幽门螺旋菌 |
+ |
- |
- |
? |
? |
? |
- |
+ |