方法名称： 人参再造丸－盐酸小檗碱的测定－高效液相色谱法

应用范围： 本方法采用高效液相色谱法测定人参再造丸中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药人参再造丸。

方法原理： 本品加盐酸-甲醇混合溶液超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液通过中性氧化铝柱，以乙醇洗脱，洗脱液加乙醇定容，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长345nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。

试剂： 1. 盐酸-甲醇（1：100）的混合溶液

2 .乙醇

3 .乙腈

4 .0.05mol/L磷酸二氢钾溶液

仪器设备： 1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液=28 72

2.2检测波长：345nm

2.3柱温：室温

试样制备： 1. 称取供试品

精密称定本品5g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含50mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇（1：100）的混合溶液50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇（1：100）的混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，浓缩至约10 mL，通过中性氧化铝柱（100~120目，5g，内径0.9cm，湿法装柱，用甲醇30 mL预洗）上，以乙醇25 mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

操作步骤： 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长345nm处测定盐酸小檗碱（C20H18ClNO4）的峰面积，计算出其含量。

参考文献： 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p313。