临床咬合重建修复及深覆合、反颌等的正畸治疗中常涉及咬合垂直距离（occlusal vertical dimension，OVD）的升高研究表明，咬合不对称可引起慢性颈痛；咬合平面倾斜将导致下颌应力向颈椎转移，并产生补偿性颈椎姿势变化[5]；大鼠单侧咬合升高可导致脊柱侧弯等[6].这些研究提示颌位与咬合对整个口颌系统甚至全身的和谐均有着重要影响，咬合升高应在不改变咬合模式的前提下获得生理适应性改建，否则可能引起口颌系统甚至全身的不良反应。本试验拟采用两种咬合板升高大鼠咬合垂直距离，以观察其对大鼠咬合关系、体重增长和脊柱形态的影响，为后续研究的动物模型建立提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

实验动物由中山大学实验动物中心提供。40周龄雄性Wistar大鼠24只，平均体重 470 g，清洁级，按体重顺序编号，随机分为全牙列咬合板（Full Splint， Full-S）组、双侧后牙咬合板（Posterior Splint，Post-S）组和C组（对照组），每组8只。观察时间为4周。

1.2 两种咬合板的设计及制作

1.2.1 准备工作 大鼠用5%水合氯醛（0.6 mL/100 g体重，下同）腹腔注射麻醉。用个别托盘及硅橡胶（3M ESPE ExpressTM）取上颌全牙列印模，超硬石膏（日本，MG）灌模。咬合板在模型上制作，口内试戴调牙合，树脂粘接（3M，ESPE，RelyXTM ARC）。

1.2.2 Full-S组 在石膏模型上制作上切牙带环固位的铸造金属支架加透明塑料上颌全牙列咬合板，粘接于上颌前牙及双侧磨牙。使下颌前后牙在正中和前伸颌位均与咬合板接触，咬合板厚度在第一磨牙区约1.5～2 mm.

1.2.3 Post-S组 在石膏模型上放置1.5 mm不锈钢珠于上颌双侧第一磨牙区，制作带前牙及腭部连接体的咬合基板，并在口内堆塑树脂（3M， ESPE，FiltekTM Z250），与下颌后牙均匀接触至钢珠高度，光照固化，调牙合，树脂粘结，最后去除前牙及腭部连接体，完成双侧后牙咬合板。在正中颌位仅双侧后牙接触，前伸颌位仅前牙接触。咬合板厚度在第一磨牙区约1.5～2 mm.

1.3 一般观察

包括咬合板存留情况、咬合关系及行为观察，记录每天体重并描绘体重增长曲线、上下切牙咬合偏斜情况及全身姿势变化。

1.4 脊柱X线片定点测量

咬合板戴入4周后，在5%水合氯醛腹腔注射麻醉下，采用有机玻璃自制大鼠X线拍片箱，拍摄全身正、侧位片（日本， Shimadzu，500 mA），投照条件为45 mV， 5 mAs，球管距大鼠1 m.在正位片上，以X线片上寰椎（C1）顶点与第4骶椎（S4）中点连线作为脊柱中线，在硫酸纸上标记第4颈椎（C4）、第1胸椎（T1）、第6胸椎（T6）、第10胸椎（T10）及第4腰椎（L4）中点，测量各点偏离中线的距离；在侧位片上，标记脊柱最大弯曲处两胸椎上下缘切线的垂线，测量交角θ值作为胸椎最大弯曲度医`学教育网搜集整理。

1.5 统计学分析

采用完全随机设计资料单因素方差分析检验实验前3组间的体重差异；采用重复测量数据方差分析检验实验后0～4周3组间的体重变化趋势差异。经正态检验及方差齐性检验， 脊柱X线片各定点测量数据可采用完全随机设计资料单因素方差分析进行检验。3组间的多重比较采用LSD-t检验。所有数据的分析用SPSS 13.0统计软件包完成，显著性水平为0.05.

2 结果

2.1 一般观察

观察期间Full-S和Post-S咬合板固位良好无脱落，Full-S组大鼠咬合发生不同程度偏斜，并出现斜颈、脊柱屈曲现象。而Post-S组大鼠咬合及行为未见明显变化。

2.2 体重变化

实验前后测得各组大鼠的体质量具体情况见表1.可见Full-S组大鼠于实验后体质量明显下降。单因素方差分析结果表明，实验前3组大鼠的体质量差异无统计学意义（F=0.980，P=0.392）。重复测量数据方差分析结果表明，实验0～4周3组大鼠体质量随时间变化的趋势差异有统计学意义（F=2.958，P=0.011）。LSD-t检验结果表明：①Full-S组与Post-S组大鼠体质量随时间变化的趋势差异有统计学意义（P=0.011）； ②Full-S组与对照组大鼠体质量随时间变化的趋势差异有统计学意义（P=0.003）； ③Post-S组与对照组大鼠体质量随时间变化的趋势差异无统计学意义（P=0.594）。由表1绘制的体质量增长曲线。

2.3 脊柱X线片定点测量

正位片：可见对照组大鼠脊柱各测量点均位于中线上；Full-S组大鼠脊柱部分测量点明显偏离中线； Pos-S组大鼠脊柱各测量点基本位于中线上。单因素方差分析结果表明，于C4、T1、T6处脊柱偏移值3组大鼠间差异无统计学意义（P >0.05）；而T10、L4处，差异均有统计学意义（P0.05）。

侧位片：对照组及Post-S组大鼠最大胸椎曲度α正常； Full-S组α明显增大。单因素方差分析结果表明，3组间的胸曲角度差异有统计学意义（F=8.790，P=0.002）。LSD-t检验结果：Full-S组大鼠脊椎胸曲角度α明显增大，与其他两组相比差异均有统计学意义（P< 0.05）；Post-S组和对照组间差异无统计学意义（P=0.746）。

3 讨论

3.1 OVD升高动物模型的建立

咬合垂直距离（OVD）升高是口腔临床的常用治疗手段，比如颞颌关节病的治疗、Ⅱ类和Ⅲ类错牙合的矫正以及咬合重建修复等常涉及颌位的调整及咬合垂直距离的升高。患者能适应新建的OVD是咬合重建修复成功的关键。采用动物模型模拟OVD升高对了解其对口颌系统及全身的影响有重要的参考价值，而动物模型的建立涉及到所选择的动物种类、咬合升高材料、升高范围、观察时间和评价指标等。

用于OVD升高试验的动物包括豚鼠、大鼠、兔、猪、猴等。大鼠因下颌运动及颞下颌关节组织形态与人类相似，实验成本相对较低，因此常用于咬合创伤[7]及咬合升高动物模型的建立.由于临床上咬合重建修复一般在成人进行，且以中老年人为主，因此本实验选择40周龄大鼠建模。

OVD升高动物实验中常用方法有：在全牙列上粘固咬合板在双侧磨牙咬合面直接堆塑树脂[8].嵌体式咬合升高装置，在动物后牙预备洞型再粘固升高装置前牙升高，后牙被动萌出恢复咬合接触OVD升高装置要求易于成形、固位好、升高距离可测、耐磨耗且不磨损对颌牙等，但目前尚无理想方法。对于OVD升高范围，Yabushita认为Wistar大鼠咬合垂直距离升高2.0 mm为最大张口度的30%，属于生理性适应范围.

本实验中大鼠OVD升高距离设定为1.5～2.0 mm，在可适应范围内。咬合板采用精细印模和模型技术在体外制作并在口内调牙合、粘接，观察期间两种咬合板均达到良好固位与稳定效果。其中，Full-S制作过程中采用定量控制蜡型高度（在第一磨牙中央凹定点放置1.5 mm直径的不锈钢珠，充胶时去除钢珠，完成后用卡尺测量），保证了每个大鼠咬合板双侧高度相同。而Post-S的钢珠直接埋置在双侧第一磨牙作为高度导向，具有双侧对称平衡性，X线标记性。两种咬合板均可在粘结前和取材后直接测得各点厚度，以便评估升高距离和磨耗量，这与在口内直接粘接咬合面干扰物的方法有更好的可控性。另外，试戴调牙合及粘接过程由同一名操作者完成，可保证每只大鼠左右两侧咬合板的一致性。

3.2 不同咬合板对大鼠咬合模式的影响

大鼠的牙列式为：I1/1 M3/3，16正常情况下咬合模式为正中颌位后牙接触时前牙与腭部粘膜接触，前牙覆牙合、覆盖均约为2.5～3.0 mm，而前伸颌位前牙切对切咬合时上下第一磨牙间也存在大约2.5～3.0 mm间隙。因此大鼠咬合的边缘范围相对人类更大。全牙列咬合板即前后牙同时接触的咬合板，在临床上用于颞颌关节紊乱病（temporomandibular joint disorder，TMD）的治疗，其中稳定性咬合板、再定位咬合板及牙合调位咬合板均属于此列，其治疗机理在于通过OVD的升高阻断中枢神经系统对病变牙合位的记忆，从而缓解过大肌张力产生的疼痛，最终通过调牙合、咬合重建修复或正畸治疗在新的颌位上建立咬合接触关系。本试验中Full-S设计为OVD升高同时前后牙均匀接触，导致大鼠失去正中颌位的记忆，前牙切导基本消除，因此出现不同程度的咬合偏斜；提示治疗性咬合装置如果长期戴用将会引起咬合紊乱。而Post-S设计仅后牙接触，虽然OVD升高高度与Full-S基本一致但基本保留了大鼠原有咬合模式，即后牙咬合时前牙不接触，而前牙咬合时后牙不接触，因此戴牙后未发现咬合偏斜现象。提示咬合装置在不改变原有咬合模式的情况下可不引起颌位异常。

3.3 咬合与全身健康的关系及其评价方法

大鼠营养摄入和生长是否正常直接表现为体重增长。因此咬合装置是否符合生理要求可通过体重增长曲线来评价本实验中戴Full-S咬合板大鼠体重明显下降，可能由于体积较大，缩小了大鼠的固有口腔，食物不易在口腔内混合，并且影响吞咽，导致营养摄入不足而明显影响体重增长。而佩戴Post-S咬合板的大鼠体重增长正常，表明大鼠可以适应这种咬合板的咀嚼模式，并能用该咬合板正常进食。

咀嚼系统神经传导及解剖结构与脊柱具有密切关系。研究表明发育型偏颌畸形患者颈椎正位X线片显示颏部及第4～6颈椎棘突偏离中线程度大于正常人；人为造成咬合干扰可检查到上段颈椎及骶椎关节运动异常正畸治疗中长期升高咬合垂直距离会导致颈椎位置的异常等。

人类正常脊柱形态的维持有赖于头部及躯干各部位的肌力平衡.而对于爬行类动物来说同样遵循这一规律。D′Attilio的测量结果发现大鼠单侧OVD升高可导致胸椎T6、T10有偏移，而双侧咬合平衡后脊柱可回复正常.本实验中参考了D′Attilio采用X线拍片的方法评价脊柱排列的做法，并将他们设计的无底金属拍片框改为X线透射的有机玻璃拍片箱，具有稳定性和可重复性好的优点。结果发现佩戴Full-S咬合板后大鼠也出现斜颈、脊柱侧弯及曲背等现象，T10、L4明显偏移、胸曲明显增大，提示切导异常、咬合板重量等因素也会导致头面部肌群负荷增加，并诱发胸椎和腰椎排列的代偿性改变。而Post-S咬合板戴用后大鼠未出现脊柱形态的改变，表明大鼠对这种咬合板的适应是在生理性范围内。

本试验结果表明，采用间接直接法完成的上颌双侧后牙咬合板用于OVD升高，未对全身发育及脊柱排列形态产生明显影响，可推荐用于OVD升高大鼠模型的建立；而前后牙同时接触的全牙列咬合板可能由于改变了大鼠咬合模式，未能达到生理性适应，从而导致了体重明显降低和脊柱形态的改变。提示咬合与全身有着密切联系，通过观察咬合关系、体重增长曲线和脊柱的形态可以了解试验性咬合装置是否为动物所适应，从而评价动物模型的可用性。