青霉素适用于敏感细菌所致各种感染，如脓肿、菌血症、肺炎和心内膜炎等。
其中青霉素为以下感染的首选药物：
1．溶血性链球菌感染，如咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、蜂窝织炎和产褥热等。
2．肺炎链球菌感染如肺炎、中耳炎、脑膜炎和菌血症等。
注射用青霉素钾
3．不产青霉素酶葡萄球菌感染。
4．炭疽。
5．破伤风、气性坏疽等梭状芽孢杆菌感染。
6．梅毒（包括先天性梅毒）。
7．钩端螺旋体病。
8．回归热。
9．白喉。
10．青霉素与氨基糖苷类药物联合用于治疗草绿色链球菌心内膜炎。
青霉素亦可用于治疗：
1．流行性脑脊髓膜炎。
注射用青霉素钾
2．放线菌病。
3．淋病。
4．奋森咽峡炎。
5．莱姆病。
6．多杀巴斯德菌感染。
7．鼠咬热。
8．李斯特菌感染。
9．除脆弱拟杆菌以外的许多厌氧菌感染。
风湿性心脏病或先天性心脏病患者进行口腔、牙科、胃肠道或泌尿生殖道手术和操作前，可用青霉素预防感染性心内膜炎发生。
