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银杏叶片-含量测定

总黄酮醇苷 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500,山奈素峰与异鼠李素峰的分离度应大于1.5。

对照品溶液的制备 分别提取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml分别含0.03mg、0.03mg、0.02mg的溶液,作为对照品溶液。

供试品溶液的制备 取本品10片,除去薄膜衣,精密称定,研细,取约相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHZ)20分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,置100ml锥形瓶中,加甲醇10ml、25%盐酸溶液5ml,摇匀,置水浴中加热回流30分钟,迅速冷却至室温,转移至50ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,取滤液,即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,分别计算槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量,按下式换算成总黄酮醇苷的含量。

总黄酮醇苷含量=(槲皮素+山奈素+异鼠李素)×2.51

本品总黄酮醇苷不得少于9.6mg。

萜类内酯 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相;用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500,白果内酯峰与银杏内酯C峰的分离度应应大于1.5。

对照品溶液的制备 分别提取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml分别含1mg、1mg、1mg、0.5mg的混合溶液,即得。

供试品溶液的制备 取本品20片,除去薄膜衣,精密称定,研细,取约相当于萜类内酯19.2mg的粉末,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHZ)20分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液20ml,回收甲醇残渣加水10ml,置水浴中温热使溶散,加2%盐酸溶液2滴。用乙酸乙酯振摇提取4次(15ml、10ml、10ml、10ml),合并提取液,用5%醋酸钠溶液20ml洗涤,分取醋酸钠液,再用乙酸乙酯10ml洗涤。合并乙酸乙酯液及洗液,用水洗涤2次,每次20ml,合并水洗液,用乙酸乙酯10ml洗涤,合并乙酸乙酯液,回收乙酸乙酯至干,残渣用丙酮溶解并转移至5ml量瓶中,加丙酮至刻度,摇匀,即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl,供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量,即得。

本品每片含萜类内酯以白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的总量计,不得少于2.4mg。

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