方法名称： 冰硼散—硼砂的测定—分光光度法

应用范围： 本方法采用分光光度法测定冰硼散中硼砂的含量。

本方法适用于中成药冰硼散。

方法原理： 供试品加甲醇振摇滤过，滤液中加入姜黄素溶液及浓硫酸-冰醋酸溶液，摇匀甲醇定容得供试液。置紫外可见分光光度计,于波长530nm处测定姜黄素与硼砂在酸性非水介质中形成的红色络合物的吸收度，计算出其含量。

试剂： 1.浓硫酸—冰醋酸 1:1

2.甲醇

3.硼砂

4.姜黄素

仪器设备： 分光光度计

试样制备： 1.对照品溶液的制备

精密称取硼砂适量，加甲醇制成1mg/mL的硼砂对照品储备溶液。

2.标准溶液的制备

精密量取上述硼砂对照品储备溶液40，80，120，160，200µL，分别置于5个10mL量瓶中，分别加入0.0125%姜黄素溶液0.5mL及浓硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，摇匀。以甲醇定容至，放置20min，作为绘制标准曲线的系列标准溶液。

3.供试品溶液的制备

精密称取供试品100mg，加入15mL甲醇摇匀，浸渍2h，不断振摇。滤过，以甲醇洗涤残渣，洗涤液与滤液合并定容至25mL，作为供试品溶液，备用。

4.供试品测定溶液的制备

精密量取上述供试品溶液50µL，加入0.0125%姜黄素溶液0.5mL及浓硫酸-冰醋酸溶液(1:1)6mL，摇匀,加甲醇定容至10mL，混匀，放置20min，作为供试品测定溶液。

注1：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一，“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤： 1.标准曲线的绘制

将上述标各系列标准溶液，于波长530nm处测定吸收度。以硼砂溶液浓度对吸收度值作线性回归，绘制标准曲线。

2.供试品的测定

供试品测定溶液，于波长530nm处测定吸收度，计算含量。

注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3-0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。