方法名称：

护肝片-五味子乙素测定-高效液相色谱法

应用范围：

本方法采用高效液相色谱法测定护肝片中五味子乙素的含量。

本方法适用于中成药护肝片。

方法原理：

供试品加正己烷超声提取，过滤，低温蒸干，残渣加甲醇定容，用高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测五味子乙素的吸收值，计算其含量。

试剂：

1. 甲醇

2. 五味子乙素对照品(中国药品生物制品检定所)

仪器设备：

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱：十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂(ODS柱，5μm，4.6mm×250mm)，理论板数按五味子乙素计应符合规定。

1.3紫外吸收检测器

1.4超声发生器

2 色谱条件

2.1流动相：甲醇+水=72+28，流速:1.2ml/min

2.2检测波长：254nm

2.3柱温：室温

试样制备：

1. 对照品溶液的制备

取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含0.05mg的溶液，即得。

2. 供试品溶液的制备

取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取2.5g，精密称定，置锥形瓶中，加正己烷适量，超声提取2次，每次30min，过滤，合并2次滤液，低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

操作步骤：

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于254nm处测定五味子乙素的吸收值，计算出其含量。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

参考文献：

高宇源，马梅芳，HPLC快速测定护肝片中五味子乙素的含量，山东中医杂志，2003，22（1）：40-42。