材料

1 药物鼻渊舒口服液的制备，由成都华神制药厂生产，主要由黄芩、龙胆草、白芷、柴胡、苍耳子、辛夷、黄芪、川芎等组成。稀化粘素，德国保时佳大药厂生产， 进口注册证号：X980578。青霉素V钾片，长春市新安制药厂生产，批号：133589。2 动物 SD大鼠90只，一级动物，体重200～250 g，3月龄，雌雄各半，四川大学华西医学中心实验动物中心提供，合格证号：川实动管第70号。饲养于成都中医药大学附属医院药理实验中心，室内温度由空调控制在20～25℃。

3 试剂TNF-α（N-19）一抗购自Santa Cruz Biotechnology 公司，其二抗以及试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。

方法

1 动物分组 自由喂养 1 周后，将实验动物随机分为①中药高剂量组；②中药中剂量组；③中药低剂量组；④西药1（稀化粘素）组；⑤西药2（青霉素V钾）组；⑥西药+中药组；⑦模型组；⑧假模型组；⑨空白组。每组10只，共90只。2 急性鼻窦炎大鼠模型 依据Y. Ge1的方法制造模型改进。腹腔注射盐酸氯胺酮5 mg/100 g体重,必要时用一般剂量重复 1 次，做全麻。用盐酸利多卡因20 mg/ml,配肾上腺素0.012 5 mg，作鼻背下注射麻醉。剃毛，用碘伏消毒备皮，在面中线上中1/3交界处旁开3 mm以45°角进针1.5 mm置石蜡适量于内封口；然后塞入适量带有金黄色葡萄球菌的明胶海绵于内，由于是微创，不必缝合。以上过程应在显微镜下操作，以确保动作到位。假模型组造模方法同上，但注入明胶海绵的不是金黄色葡萄球菌，而是生理盐水。

给药情况

从造模成功后的第1天开始灌胃，疗程时间为7 d，灌胃情况如下：

（1）中药高剂量组 每日以相当于临床成人剂量20倍的鼻渊舒口服液〔相当于鼻渊舒口服液10 ml/(kg·d）-1〕灌胃，分早晚两次灌服。

（2 ）中药中剂量组 每日以相当于临床成人剂量10倍的鼻渊舒口服液〔相当于鼻渊舒口服液5 ml/(kg·d）-1〕灌胃，分早晚两次灌服。

（3） 中药低剂量组 每日以相当于临床成人剂量5倍的鼻渊舒口服液〔相当于鼻渊舒口服液2.5 ml/(kg·d）〕灌胃，分早晚两次灌服。

（4 ）西药1组每日以相当于临床成人剂量5倍的稀化粘素〔相当于稀化粘素75 mg/（kg·d）〕灌胃，分早晚两次灌服。

（5 ）西药2组每日以相当于临床成人剂量5倍的青霉素V钾〔相当于青霉素V钾 125 mg/（kg·d）〕；灌胃，分早晚两次灌服。

（6） 假模型组每日以与用药组等容（2 ml/d）的生理盐水灌胃，分早晚两次灌服。

（7 ）模型组每日以与用药组等容（2 ml/d）的生理盐水灌胃，分早晚两次灌服。

（8 ）空白组不灌胃

（9 ）中药+西药组每日以临床成人剂量6倍的鼻渊舒口服液（浓度0.815 925 g/ml）2～3 ml和含药量相当于150 mg·kg-1·d-1的青霉素与稀化粘素灌胃，分早晚二次灌服。给药方法参照《中药药理实验方法》。

检测方法首先要及时把取下的鼻黏膜放在固定液中保存，经脱钙后，按照下列步骤进行：①石蜡切片脱蜡至水，用PBS液（0.01 mol/L pH7.4）冲洗3次×5 min。②3%H2O2室温孵育10 min，以消除内源性过氧化物酶的活性,室温下孵育10 min。③蒸馏水冲洗，PBS浸泡5 min。④10%的正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10 min。倾去血清，勿洗，滴加1：100比例稀释的一抗，37℃孵育1 h。⑤PBS冲洗，5 min×3次。⑥滴加第二代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育30 min。⑦PBS冲洗，5 min×3次。⑧滴加第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃孵育30 min。⑨PBS冲洗，5 min×3次。⑩显色剂显色（DAB或AEC）。然后用自来水充分冲洗，苏木精复染，封片。用显微镜结合计算机图形图像分析系统，在200×光镜下，随机选取3个视野进行面积、积分光密度、平均黑度的测量。计量资料以±s表示，用SPSS13.0软件进行单因素方差分析。

结果

模型组大鼠鼻黏膜TNF-α积分光密度、平均光密度分别与测量视野面积和的比值，明显高于正常对照组（P<0.01）；平均黑度值明显低于正常对照组（P<0.01）；但黄染面积与面积总和的比值无统计学意义。与空白组相比：①积分光密度/面积总和的比值，中药低、中剂量组、西药一组、假模型组无显著性差异（P>0.05），其中以中药低剂量组最为接近；②黄染面积/面积总和的比值，无统计学意义；③平均光密度与面积总和的比值，西药1组、中药低剂量组、西药2组无显著性差异（P>0.05）。④平均黑度，中药低、中组，西药1，2组无显著性差异（P>0.05）。结果见表1。