照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录Ⅴ D)测定。色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.68%磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相；检测波长为214nm。理论板数按乙酰半胱氨酸峰计算应不低于2500，乙酰半胱氨酸峰与内标物峰的分离度应符合要求。
内标溶液的制备 精密称取苯丙氨酸约1g，置200ml量瓶中，加新制备的焦亚硫酸钠溶液(1→2000)150ml，振摇使苯丙氨酸溶解，用焦亚硫酸钠溶液(1→2000)稀释至刻度，摇匀。
测定法
取本品10包的内容物完全转移至500ml量瓶中，加焦亚硫酸钠溶液(1→2000)约150ml，振摇使其溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取25ml，置100ml(0.1g)或200ml(0.2g)量瓶中，精密加入内标溶液5ml(0.1g)或10ml(0.2g)，加焦亚硫酸钠溶液(1→2000)稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液为供试液；取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。另取乙酰半胱氨酸对照品0.050g，置100ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加焦亚硫酸钠溶液(1→2000)稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，同法测定，按内标法以峰面积计算。
