CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍，所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法，其中后者最常用，为国内外测定CK的参考方法。CK同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定，但两法均会受溶血和巨CK的干扰，免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰医`学教育网搜集整理。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定CK-MBmass，可不受溶血和巨CK的干扰。CK 同工酶亚型（CK-MM 亚型 和 CK-MB亚型 ）多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。
