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HLA血清学分型法的原理和技术要点

  血清学分型法方法:补体依赖的微量细胞毒试验(CDC)。分型抗原:SD抗原,包括HLA-A、B、C、DR、DQ.

  (一)原理

  标准血清+淋巴细胞,形成抗原抗体复合物,加入补体,在补体的作用下,细胞被溶解。溶解的细胞可被加入的染料(台盼蓝、伊红)着染,即为阳性反应,计数死细胞数,作出结果判断医学教.育网搜集整理。

  (二)技术要点

  1.CDC试验的关键在于获得标准抗血清,与ABO血型抗体不同,主要获自经产妇。

  2.抗血清种类应覆盖本民族、本地区80%以上的抗原。

  3.Ⅱ类抗原,仅分布于B细胞或巨噬细胞表面,故检测Ⅱ类抗原应分纯B细胞医学教.育网搜集整理。

  4.注意下列假象:①粒细胞和单核细胞能够非特异性地,吞噬染料而造成着染假象,应注意细胞形态的区别。②血小板与淋巴细胞竞争,结合HLA抗体而导致假阴性结果,可用玻璃珠脱纤维抗凝。③红细胞沾染易致假阳性。④单克隆抗体复合物不能激活补体,不能用于CDC,可改用ELISA、FCM.

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