1.与亚硝酸钠-硫酸的反应
苯巴比妥在硫酸存在下与亚硝医`学教育网搜集整理酸钠作用生成橙黄色产物，随即转为橙红色。可用于区别苯巴比妥与其他不含苯环的巴比妥类药物。
2.与甲醛-硫酸的反应
苯巴比妥在硫酸存在下与甲醛反应生成玫瑰红色产物，可用于区别苯巴比妥与其他巴比妥类药物。
方法：取供试品约50mg，置试管中，加甲醛试液1ml。加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5ml，使成两液层，置水浴中加热，接界面显玫瑰红色。
3.红外光谱法
苯巴比妥具有羰基、酰胺和苯环结构，有特征红外光谱，可用于鉴别。《中国药典》规定，本品的红外吸收图谱应与对照的图谱一致。
4.丙二酰脲类的鉴别反应
巴比妥类药物含有丙二酰脲结构，在碱性条件下，可与某些重金属离子反应，生成沉淀或有色物质。
这一特性可用于本类药物的鉴别。
