医学教育网临床医学检验技士《答疑周刊》2015年8期：

【问题】细胞内胆固醇少了LDL受体会增加，为什么是负反馈调节？？

LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL与LDL受体结合后，内吞入细胞，经溶酶体酶作用，胆固醇酯水解成游离胆固醇。若胞内胆固醇浓度升高，可通过：

①抑制HMGCoA还原酶，减少自身的胆固醇合成；

②抑制LDL-R基因的表达，减少LDL-R的合成，从而减少LDL的摄取；

③激活内质网脂酰基CoA胆固醇酰基转移酶（ACAT），使游离胆固醇在胞质内酯化成胆固醇酯贮存，从而控制细胞内胆固醇含量，使其处于正常动态平衡状态。因此为负反馈调节。

2免疫印迹法和斑点酶免疫吸附试验区别

免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。免疫印迹法(immunobiottingtest,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似，亦被称为Western-blot.

酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA)：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯微量反应板)表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。

免疫印迹法和斑点酶免疫吸附试验两者的反应原理不同。免疫印迹法(Westernblotting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术；而酶联免疫吸附试验是双抗体夹心法。因此两者还是不同的。

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【问题】Coombs试验的配血原理是什么？

凡Coombs试验即抗人球蛋白试验，是检测血液中温反应性抗体的一种方法，也是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要指标。温抗体中50%以上由IgG介导，其次为IgM，IgA和C3d等，因此本试验应分选各种单克隆抗体同时测定。Coombs试验分为直接试验（直接反应）和间接试验（间接反应）：直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体；间接试验的目的是检查血清中存在游离的不完全抗体。

（1）直接coombs试验用于检测已粘附在红细胞表面的不完全抗体。即将受检红细胞充分洗涤后，将抗球蛋白试剂加入已结合有抗体的受检红细胞悬液中，即可见细胞凝集。可用玻片法做定性试验，也可用试管法或微量法做半定量测定。用于检测新生儿溶血症、自身免疫性贫血和医源性溶血性疾病等。

（2）间接coombs试验用于检测游离在血清中的不完全抗体。即将待测血清标本加入具有特异抗原的红细胞悬液中，如果抗原抗体相应则发生结合，再加入抗球蛋白抗体，则出现红细胞凝集。本法多用于检测母体Rh（D）抗体以及因红细胞不相容的输血而产生的血型抗体。此外也可用专一特异性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗补体血清等，分析与红细胞表面结合的不完全抗体的Ig亚类。

【问题】內源性溶血形成的复合物是FIXa还是FXIa？

凝血因子特性凝血因子目前包括14个，除FⅢ存在于全身组织中，其余均存在于血浆中。

根据理化性质分为四组。

（1）依赖维生素K凝血因子

包括FⅡ、FⅦ、FⅨ和FⅩ，其共同特点是在各自分子结构的氨基末端含有数量不等的γ-羧基谷氨酸残基，在肝脏合成中必须依赖维生素K。依赖维生素K凝血因子（依K因子）通过γ-羧基谷氨酸与Ca2＋结合，再与磷脂结合，这是依K因子参与凝血反应的基础。

（2）接触凝血因子

包括经典FⅫ、FⅪ和激肽系统的激肽释放酶原（PK）、高分子量激肽原（HMWK）。它们的共同特点是通过接触反应启动内源凝血途径，并与激肽、纤溶和补体等系统相联系。

（3）对凝血酶敏感的凝血因子：

包括FⅠ、FⅤ、FⅧ和FⅩⅢ，它们的共同特点是对凝血酶敏感。

（4）其他因子

包括FⅢ、FⅣ。正常情况下，FⅢ不存在于血液中。FⅣ即Ca2＋。凝血机制

凝血过程示意图

内源凝血途径

内源凝血途径（intrinsicpathway）是指由FⅫ被激活到FⅨa-Ⅷa-Ca2＋-PF3复合物形成的过程。

外源凝血途径

外源凝血途径（extrinsicpathway）是指从TF释放到TF-FⅦa-Ca2＋复合物形成的过程。

共同凝血途径。

【临床免疫学检验】

免疫学技术中的亲和层析法，利用抗原抗体反应哪个特点来纯化抗原或抗体

A．比例性

B．特异性

C．可逆性

D．亲和力

E．疏水作用力

【正确答案】C

学员提问：答案是D吧。

解析：可逆性：可逆性指抗原抗体结合后形成的，复合物在一定条件下可发生解离，恢复抗原抗体的游离状态。抗原抗体结合是分子表面的结合，犹如酶与底物的结合，是一种非共价键结合，结合虽稳定但可逆；抗原抗体的结合是一种动态平衡过程，抗原抗体复合物的解离取决于抗体对相应抗原的亲和力及反应条件（如离子强度、pH等）。免疫学技术中的亲和层析法就是利用这个原理来纯化抗原或抗体。因此答案为C。

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【临床微生物学】

有关荚膜描述错误的是

A.具有免疫原性，可用于鉴别细菌

B.—般在机体内形成

C.具有抗吞噬作用

D.可增强细菌对热的抵抗力

E.化学成分可以是多糖，也可以是多肽等

【正确答案】D

学员提问：细菌夹膜一般是在机体内形成吗？不是某些细菌原来就存在的？

解答：细菌一般在机体内和营养丰富的培养基中才能形成荚膜。有荚膜的细菌在固体培养基上形成光滑型（s型）或粘液型（m）菌落，失去荚膜后菌落变为粗糙型（r）。荚膜并非细菌生存所必需，如荚膜丢失，细菌仍可存活。荚膜除对鉴别细菌有帮助外，还能保护细菌免遭吞噬细胞的吞噬和消化作用，因而与细菌的毒力有关。荚膜抗吞噬的机理还不十分清楚，可能由于荚膜粘液层比较光滑，不易被吞噬细胞捕捉之故。荚膜能贮留水分使细菌能抗干燥，并对其他因子（如溶菌酶、补体、抗体、抗菌药物等）的侵害有一定抵抗力。

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【临床血液学检验】

急性早幼粒细胞白血病细胞一般检测不到下列哪种融合基因

A．PML-RARα

B．PLEF-RARα

C．Bcr/abl

D．NPM-RARα

E．以上融合基因都检测不到

【正确答案】C

学员提问：请解释一下。

解答:慢性髓细胞性白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)细胞有t(9；22)(q34；q11)易位形成的费城染色体(Phchromosome)和BCR/ABL融合基因，它们在血液病研究中占有重要地位。在发现Ph染色体后的30多年里，临床广泛用细胞遗传学方法检测Ph染色体做CML的诊断和疗效监测。尤其近十余年，分子生物学方法检测BCR/ABL融合基因的应用逐渐普及。因此急性早幼粒细胞一般检测不到Bcr/abl。

因此答案为C。祝您顺利通过考试！

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