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免疫功能是机体的重要生理功能,免疫系统异常或失调将导致多种疾病,因此在临床中经常需要对免疫系统及其功能进行监测。免疫细胞是免疫功能的物质基础,所以对免疫细胞数量的检测是评价监测免疫功能的重要手段和途径。
一、免疫细胞表面标志的检测方法
表面标志的检测通常要采用相应的标记单克隆抗体为探针,通过标志物对阳性细胞作出指示,对有关细胞进行计数,根据标志物的不同形成了不同的检测方法,有代表性的几种方法为:
(一)抗体致敏细胞花环法
(二)免疫细胞化学法
(三)免疫荧光法
本法是将分离得到的外周血单个核细胞与相应的以荧光素标记的CD单克隆抗体作用(直接法),或与抗相应CD单克隆抗体作用后,洗去游离的抗体,再加入荧光素标记的抗小鼠IgG抗血清,经温育结合后,洗去多余的标记抗体(间接法),制片后用荧光显微镜观察结果,计算阳性细胞占总计数细胞的百分率。
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